NY∕T 2545-2014 植物性农产品中黄曲霉毒素现场筛查技术规程(农业)
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ID： |
10CAFA7F0F0146F793F2853200007038 |
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文件大小(MB)： |
0.41 |
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页数： |
7 |
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文件格式： |
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日期： |
2021-12-28 |
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ICS 65.020.01,B 05 NY,中华人民共和国农业行业标准,NY/T 2545一2014,植物性农产品中黄曲霉毒素,现场筛查技术规程,Technical regulation for on-site screening aflatoxin,in plant products,2014 - 03 - 24 发布2014 - 06 - 01 实施,中华人民共和国农业部发布,NY /T 2545-2014,刚吕,本标准按照GB/ T 1. 1-2009 给出的规则起草,本标准由农业部种植业管理司提出并归口,本标准起草单位:中国农业科学院油料作物研究所、农业部油料及制品质量监督检验测试中心,本标准主要起草人:李培武、张奇、姜俊、丁小霞、张文、周海燕、唐晓倩、王督、张兆戚,I,NY/T 2545一2014,植物性农产品中黄曲霉毒素现场筛查技术规程,1 范围,本标准规定了植物性农产品(谷物、豆类、坚果及籽类)中黄曲霉毒素现场筛查的技术规程,本标准适用于植物性农产品(谷物、豆类、坚果及籽类)生产、收获、储藏、运输过程控制中黄曲霉毒,素的现场筛查,2 规范性引用文件,下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文,件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件,GB/ T 6682 分析实验室用水规格和试验方法,3 试剂,除非另有规定，仅使用分析纯试剂,3. 1 水: 符合GB/ T 6682 要求的二级,3. 2 甲醇(CH 3 0H) ,3. 3 二氯甲烧(CH 2 CI2 ) ,3. 4 煎糖(C1 2 H22 0 II ) ,3. 5 牛血清白蛋白(BSA) ，纯度大于98 %,3. 6 吐温20(CS8 HII' 026 ) ,3. 7 70 % 甲醇溶液: 取70 mL 甲醇(3.2) 和30 mL7j( (3 . 1)，混匀,3. 8 样品稀释液:取1. 0g 煎糖(3 . 4) 、0 . 5 g 牛血清白蛋白(3 . 5) 和2 . 5 g 吐温20(3 . 6) ，溶解于100mL,*(3. 1)中,3. 9 锦标记黄曲霉毒素BI 抗体溶液:黄曲霉毒素BI 抗体纯度80 % 以上，亲和力常数不低于1. OO X,108 L/ mol o 黄曲霉毒素BI 抗体与黄曲霉毒素B2 、黄曲霉毒素G 1 、黄曲霉毒素G2 交叉反应率小于,10 % ,3. 10 1000 ng/ mL 黄曲霉毒素BI 标准溶液,3. 11 100 ng/ mL 黄曲霉毒素BI 标准储备液: 准确吸取黄曲霉毒素BI 标准溶液(3 . 10) 1. 0 mL 于10,mL 容量瓶中，甲醇定容。一20 0C 保存，备用,4 仪器设备与材料,4. 1 时间分辨荧光检测仪: 激发波长(365 士5)nm ，检测波长(615 士5)nm ,4. 2 黄曲霉毒素荧光免疫层析装置: 固定有黄曲霉毒素- BSA 偶联物，检测灵敏度不低于0 . 1μg/,烛，用于样品中黄曲霉毒素与锦标记抗体预反应后再与黄曲霉毒素-BSA 偶联物反应的载体(图1) ,l,NY/ T 2545-2014,4. 2. 1 黄曲,4. 2. 2 样品,4. 2. 3 硝酸纤,4. 2. 4 吸水纸,4. 2. 5 底板,4. 2. 6 连接胶带,4. 3 均质机,4. 4 分析天平:感量0 . 01,4. 5 恒温装置(37. 0 士2 . 0)OC ,4. 6 游涡混合器,4. 7 微量移液器: 10μL-飞、‘、.斗.‘-,4. 8 有机相滤膜:0.45μm ,4. 9 中速定性滤纸,4. 10 烧杯:150 mL ,4. 11 离心管:5 mL ,5 抽样,5. 1 -般要求,2 2,3,5,NY/ T 2545-2014,5. 1. 1 人员,抽样人员应熟知抽样程序和方法,5. 1.2 抽样工具和包装容器,抽样人员应根据不同的产品准备相应的工具和包装容器。抽样工具和包装容器应清洁、干燥，不会,对样品造成污染,5. 2 抽样方法,5. 2. 1 田间种植环节抽样,根据抽样地块内的地形、地势,法、蛇形法等多点取样,的农产品。样品应充分混,5. 2. 2 收获晾晒环节,根据收获晾,法等多点取样，每,区设中心、四,在距边缘约,层在堆面下,参照5 .,5. 3 分样,抽样,6. 2 取1. 0 mL,于5 mL 离心管中,6. 3 取1 50 μL 锦标记黄,6. 4 取滤液(6.2)200μL.,‘ ..,荧光免疫层析装置(4.2) .按箭头方,曲霉毒素免疫层析装置，上机(4 . 1)检测,6. 5 标准曲线,6.5. 1 空白基质溶液:取阴性样品，按6. 1 、6. 2 制备空白基质溶液,l 时，随机抽取抽样点内,、下三层，上,分四层; 堆,8) 过滤，滤液收集,(4 . 6) 混匀。取出黄曲霉毒素,6. 5. 2 取黄曲霉毒素B1 标准储备液( 3 . 11) 用空白基质溶液(6.5. 1)配制标准工作溶液(0. 00 ng/ mL 、,0.05 ng/ mL 、0 . 1 0 ng/ mL 、0 . 20 ng/ mL 、0 . 50 ng/ mL 、1. 00 ng/ mL 、2 . 50 ng/ mL) .按6.4 检测，根据检,测线T 信号值与质控线C 信号值的比值CT/ C) 和标准溶液浓度的自然对数值(\nc) 建立标准曲线,7 结果计算,7. 1 结果计算与表示,3,NY/ T 2545-2014,试样中黄曲霉毒素BI 含量按式(1)计算。计算结果保留……
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